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冷凍干燥機對細胞的活性有什么影響?
冷凍干燥器又稱冷凍干燥機。冷凍干燥器就是將含水物質,先凍結成固態,而后使其中的水分從固態升華成氣態,以除去水分而保存物質的冷干設備。
實驗用凍干機是一種用于實驗室內少量樣品冷凍干燥的小型凍干機,包括殼體、制冷機組、真空泵、冷阱,電控系統。其制冷機組設置在殼體內;冷阱設在殼體上部;真空泵通過真空管道連通冷阱。
制冷機組具有壓縮機、換熱器、膨脹閥、蒸發器;還包括物料放置裝置,物料放置裝置安裝在冷阱上方及殼體上,且與冷阱上端連通;蒸發器為蒸發盤管,其設置在冷阱內。將蒸發器改設成蒸發盤管,且設置在冷阱內,降溫速度快。
實驗用凍干機在真空狀態下,從固態的樣品中直接將溶劑升華為氣態而達到干燥的目的。由于是在常溫甚至低溫狀態下干燥樣品,所以不影響其樣品的生物活性,并且處理后的樣品呈酥松多孔狀態,易于溶解。所以凍干是保存生物活性樣品的好方法。
物料的預凍是冷凍干燥過程的關鍵步驟,預凍過程的好壞直接影響冷凍干燥產品的品質。物料預凍過程基本可分為慢速冷凍、快速冷凍,用戶可根據具體需要靈活操作設備,達到物料的有效預凍。
凍干機在干燥過程中,干燥對細胞存活率的影響主要集中在干燥的第二階段。凍干樣品中殘存5%左右的水分對于維持細胞結構和胞內大分子穩定性是必要的。
凍干機在干燥時樣品表面失水較快,容易使樣品局部過干,破壞了生物大分子物質的水分子保護層,這不僅會損害細胞生物活性物質的活性,而且還會導致脂類或蛋白質的氧化反應,產生自由基,影響細胞活性。
凍干實驗中發現,保加利亞乳桿菌和嗜熱鏈球菌的冷凍和干燥的存活率分別為70.4%和89.7%,說明冷凍干燥過程中,冷凍是造成損傷的主要原因,干燥過程造成的損傷較小。影響微生物凍干效果的因素有很多,有微生物生理狀態、細胞大小、細胞濃度、pH值、冷凍保護劑、預凍溫度、降溫速率、冷凍干燥條件、細胞含水量等。
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